RESUMO

A aspergilose é uma infecção fúngica oportunista, causada por fungos do gênero Aspergillus, de alta incidência em pacientes que possuem algum tipo de comprometimento no sistema imunológico. O diagnóstico da aspergilose é uma das etapas mais importantes no processo de cura, pois a partir dele inicia-se o tratamento, o qual pode ser ineficaz se iniciado tardiamente. Muitos trabalhos publicados relatam técnicas convencionais microbiológicas, histológicas e radiológicas para o diagnóstico desta infecção fúngica, porém estas técnicas possuem baixa sensibilidade e especificidade, demorando vários dias até a confirmação do diagnóstico. A espectrometria de massas (EM) oferece uma alternativa para o diagnóstico precoce da aspergilose, uma vez que é uma técnica analítica que fornece resultados rápidos, sensíveis e seletivos. Além disso, a EM aliada a abordagens quimiométricas pode ser utilizada na diferenciação de perfis metabólicos, o que possibilita a detecção da doença em seus estágios iniciais. Nesse sentido, o objetivo deste trabalho é analisar amostras de soro sanguíneo de pacientes submetidos a transplante de medula óssea através da espectrometria de massas para o diagnóstico precoce da aspergilose. Para isso, foram analisadas amostras de soro sanguíneo de pacientes imunossuprimidos sem a infeção fúngica (n=10) e amostras de soro sanguíneo de pacientes que desenvolveram a doença (n=10). Alíquotas de 50 mL de soro sanguíneo foram submetidas ao processo de precipitação de proteínas utilizando acetonitrila contendo 0,1% de ácido trifluoracético. Em seguida as amostras foram agitadas em vórtex durante 1 minuto e então centrifugadas a 14000 rpm/ 4°C/5 min. O sobrenadante foi transferido para um novo frasco e evaporado a 40 °C em um concentrador de amostras. As amostras foram ressuspendidas com 150?L de uma solução acetonitrila/água/ácido fórmico/formiato de amônio (98:2:0,1:1mM). Foi realizada infusão direta das amostras em um espectrômetro de massas do tipo triplo quadrupolo da Applied Biosystems API 3200 equipado com uma fonte de electrospray (ESI) operado nos modos positivo e negativo de ionização. Os espectros de massas foram adquiridos na faixa de 50 a 1400 Da acumulando 100 ciclos de 3 segundos. Dado a tamanha complexidade dos espectros de massas adquiridos, não foi possível realizar a distinção visual entre os grupos analisados. Por este motivo, os dados estão sendo avaliados por meio das análises de componentes principais (PCA) com o intuito de classificar as amostras e identificar um biomarcador que detecte a doença o mais cedo possível.

Palavras-chave: Aspergilose, Espectrometria de Massas, Quimiometria