RESUMO

A síntese de biomoléculas em processos fermentativos normalmente está direta ou parcialmente associada ao crescimento microbiano. Assim o acompanhamento da cinética microbiana é essencial para a otimização de processos fermentativos. A bactéria Corynebacterium glutamicum é utilizada na produção de L-lisina, um aminoácido utilizado na nutrição animal. Em trabalhos prévios, verificou-se que a produção desse aminoácido está relacionada com o pH do meio, que deve ser mantido em torno de 7,0 e, dentre vários agentes tamponantes testados, o que apresentou os melhores resultados foi o carbonato de cálcio (CaCO3). Neste presente trabalho quantificou-se primeiramente a biomassa de Corynebacterium glutamicum em meios sem carbonato de cálcio e posteriormente em meios com CaCO3. No primeiro momento a quantificação da biomassa foi feita pelos métodos de contagem em placa de Petri, peso seco e turbidimetria. Com os resultados, foi estabelecida uma curva de correlação entre os três métodos de dosagem. Como a presença de CaCO3 no meio dificulta a dosagem, no segundo momento, estes três métodos clássicos foram adaptados para esse fim. Na análise por contagem em placa de Petri utilizou-se de diluições seriadas e cultivo da bactéria em meio contendo caldo nutriente em estufa a 37°C de 24 a 48h. Para o método de dosagem por peso seco fez-se amostras com meios contendo biomassa, caldo nutriente e carbonato de cálcio, meios com biomassa e caldo nutriente e uma amostra contendo somente caldo nutriente. Recolheu-se 1,5mL de cada amostra e centrifugou-se em várias combinações de rotação e tempo. A turbidimetria do sobrenadante foi lida em espectrofotômetro e o precipitado foi seco e pesado. A determinação de biomassa por turbidimetria foi considerada inviável, pois a grande quantidade de CaCO3 não permite a leitura da biomassa, mesmo para grandes diluições. A dosagem por peso seco também foi considerada inviável, uma vez que o erro experimental contido no peso das amostras contendo carbonato de cálcio e biomassa é da mesma ordem de grandeza do peso das amostras contendo somente biomassa. Já os resultados obtidos pelo método de contagem em placa foram satisfatórios. Porém, outros métodos deverão ser testados, como a precipitação ou solubilização do CaCO3 por agentes químicos.

Palavras-chave: Carbonato de Cálcio, Dosagem de Biomassa, Corynebacterium glutamicum