RESUMO

Herbaspirillum seropedicae estirpe SmR1 é uma bactéria fixadora de nitrogênio e endofítica que se associa com mono e dicotiledôneas através de um complexo mecanismo de interação planta-bactéria. Esta bactéria produz hormônios de crescimento, como auxinas e giberelinas, que estimulam o crescimento das raízes o que favorece a maior absorção de nutrientes e água. Devido a estas propriedades, esta bactéria é um importante alvo de pesquisas para a agricultura. O nitrogênio é um fator limitante para a produtividade do milho e por isso fertilizantes nitrogenados são utilizados em grande quantidade para garantir a demanda da produção. A uréia é o fertilizante nitrogenado mais utilizado e sua produção depende de fonte energética não renovável de alto custo. Diante disso, buscam-se então alternativas para diminuir a utilização deste fertilizante sem que haja diminuição da produção. As bactérias promotoras do crescimento vegetal e fixadoras de nitrogênio constituem uma opção bastante viável visto que promovem o crescimento vegetal e não prejudicam o ambiente. Uma etapa importante do processo de interação planta-bactéria é a confirmação da presença da bactéria inoculada ao longo do período do crescimento vegetal. O qRT-PCR é um método que tem se mostrado bastante eficiente e foi escolhido para o desenvolvimento deste projeto. Foram realizados ensaios de colonização interna de plantas de milho com a bactéria H. seropedicae SmR1 e após alguns dias de inoculação estas plantas foram avaliadas quanto a ocorrência ou não de crescimento de bactérias endofíticas. DNA bacteriano foi purificado e uma região de 250 pares de base do gene 16S rRNA foi amplificada por PCR convencional, utilizando o par de primers Y1/Y2 . Desta forma pode-se verificar a presença da bactéria na planta. Posteriormente será empregada a técnica qRT-PCR. Oligonucleotídeos iniciadores específicos para qRT-PCR foram desenhados e será possível observar a expressão de genes relacionados com a interação planta-bactéria de acordo com o tempo de interação (adesão, colonização e crescimento endofítico), refletindo assim, o metabolismo das bactérias na planta inoculada.

Palavras-chave: Herbaspirillum seropedicae, Interação Planta-Bactéria, Fixação de Nitrogênio