RESUMO

A heparina tem ampla utilização clínica na prevenção e tratamento de problemas tromboembolíticos. Ela atua como um anticoagulante por se ligar à antitrombina (AT) e ao cofator II da heparina (HCII), permitindo que estes inibidores de proteases formem complexos com enzimas da coagulação, inativando-as. Sua aplicação, entretanto, leva a efeitos colaterais, que podem ser diminuídos com o fracionamento. Heparinas não fracionadas (1 g), bovina (UB) e suína (US), cedidas pela empresa Extrasul – Extracting Quality, foram solubilizadas em 10 mL água destilada e tratadas com 7,5 mL de etanol saturado com acetato de sódio. Este tratamento levou à formação de duas frações para cada tipo de heparina: sobrenadante (SS para suína e SB para bovina) e precipitado (PS e PB), com rendimentos de aproximadamente 90% para as frações precipitadas e 10% para as sobrenadantes em ambas as amostras. O tempo de tromboplastina parcial ativada (aPTT) foi utilizado para determinar a potência das heparinas em unidades internacionais (UI/mg), obtendo-se os seguintes resultados: US=171,8 UI/mg; PS=209,8 UI/mg; SS=100,5 UI/mg; UB=142,3 UI/mg; PB=160,4 UI/ mg; SB=64,1 UI/mg. Foram testados os efeitos das heparinas sobre a atividade da a-trombina e do fator Xa nas combinações trombina+AT (T1), trombina+HCII (T2) e fator Xa+AT (T3). Todas as frações testadas inibiram as enzimas em T1, T2 e T3. Para T1 as heparinas suínas e bovinas apresentaram resultados estatisticamente semelhantes. Em T2, as heparinas suínas tiveram diferenças significativas entre PS (IC50=0,00735 UI/ mL) e SS (IC50=0,03035 UI/mL) e, nas amostras bovinas, entre PB (IC50=0,00662 UI/mL) e SB (IC50=0,04128 UI/mL). Esses resultados permitiram concluir que o fracionamento resultou em heparinas com comportamentos distintos em relação à inibição da a-trombina via HCII. Para T3, foi observada diferença estatística apenas entre os resultados obtidos com as heparinas bovinas PB (IC50=0,00461 UI/mL) e SB (IC50=0,00064 UI/ mL). Também foram realizados testes in vivo de inibição de trombose venosa em ratos. Na dose de 0,1 UI/kg, verificou-se que os trombos para as heparinas US, PS, SS, UB, PB e SB corresponderam, respectivamente, a aproximadamente 30%, 30%, 48%, 78%, 27% e 22% do peso do trombo do grupo controle (sem administração de heparina), que foi igual a 5,03 mg. Estes resultados indicam que o fracionamento das heparinas adotado neste trabalho gera frações com diferentes potências de efeito antitrombótico.

Palavras-chave: Heparina, Atividade Anticoagulante, Atividade Antitrombótica