RESUMO

Heparina é utilizada em clínica médica desde a década de 50 e, é até hoje é o agente antitrombótico de escolha. Nas últimas décadas surgiram as heparinas de baixo peso molecular (LMWH), que são obtidas pela despolimeração (química ou enzimática) da heparina não fracionada. A ação de heparina e LMWH, bem como outros agentes antitrombóticos, sobre o endotélio vascular foi investigada e observou-se que, estimulam de forma específica a síntese do proteoglicano de heparam sulfato (PGHS), e também alteram a estrutura de suas cadeias sacarídicas, promovendo um aumento na proporção do dissacarídeo característico da molécula de heparina. Este PGHS passa a ter uma atividade antitrombótica interessante, o que nos levou a propor que a atividade dos compostos antitrombóticos, pelo menos em parte, pode ser mediada por este proteoglicano. Dados anteriores mostram que o alvo de ligação é a matriz extracelular (MEC), a qual deve participar de forma indireta no mecanismo de estímulo do PGHS, mas os mecanismos envolvidos ainda são desconhecidos. Com o objetivo de avaliar os requisitos estruturais na molécula de heparina, que são responsáveis por desencadear o mecanismo de estímulo da síntese de PGHS, duas heparinas não fracionadas e duas LMWHs foram submetidas a modificações químicas de dessulfatação ou caboxirredução. A dessulfatação branda permite remover apenas os grupamentos N-sulfatado, sendo necessário utilizar outras formas de dessulfatação, como a O-dessulfatação e N/O-Dessulfatação. Apenas com a dupla dessulfatação que foram obtidos compostos com menor teor de sulfato. Já a carboxirredução levou a compostos com baixo teor de ácidos carboxílicos, praticamente sem alterar o conteúdo de grupamentos sulfato. Os resultados mostraram que as modificações químicas realizadas nas moléculas de heparina foram bem sucedidas, como comprovado nas dosagens químicas e na Ressonância Magnética Nuclear. Os dados mostraram que os grupamentos sulfatos e carboxílicos presentes na molécula de heparina são fundamentais para que o composto exerça sua atividade anticoagulante de forma plena. Com relação à capacidade de estímulo da síntese de PGHS, os resultados mostraram que somente com a dessulfatação total (Ne O-dessulfatada) que foi possível abolir o estímulo de PGHS. Por outro lado, a carboxirredução também levou a diminuição do estímulo da síntese de PGHS. Assim, os resultados permitem afirmar que o estímulo da síntese de PGHS não é apenas fruto da carga negativa, nem somente de sulfato, mas deve ser da localização espacial das cargas negativas, que devem ser avaliadas futuramente.

Palavras-chave: Heparina, Célula Endotelial, Matrix Extracelular