CARACTERIZAÇÃO DA EXPRESSÃO DE GENES DE REPARO DA VIA FANC-BRCA E DO GENE TPM2 COMO ESTRATÉGIA TERAPÊUTICA EM CARCINOMAS MAMÁRIOS

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Aluno de Iniciação Científica: Tayana Schultz Jucoski (PIBIC/CNPq)

Curso: Ciências Biológicas (M)

Orientador: Enilze Maria de Souza Fonseca Ribeiro

Co-Orientador: Iglenir João Cavalli

Departamento: Genética

Setor: Setor de Ciências Biológicas

Área de Conhecimento: 20205007


RESUMO

Segundo o Instituto Nacional do Câncer (INCA) o câncer de mama é o mais comum entre as mulheres e corresponde a 22% dos novos casos a cada ano. O câncer de mama consiste em um conjunto de doenças que possuem características moleculares e histopatológicas distintas, além de variabilidade genética. Caracteriza-se pelo desenvolvimento anormal de células da mama que passam a se multiplicar em alta taxa levando à formação de tumor. Tem sido observado um aumento na incidência assim como na mortalidade por este tipo de câncer, justificando a realização de pesquisas sobre os mecanismos relacionados com o início e progressão do tumor assim como identificação de alvos para serem usados em terapia. Dentre estes alvos, as proteínas que atuam no sistema de reparo e no citoesqueleto se mostram interessantes objetos de estudo uma vez que estão envolvidas em importantes processos celulares como reparo de danos, divisão celular e adesão. As tropomiosinas são proteínas responsáveis pela regulação da actina que atua nas células musculares juntamente com a miosina e ATP promovendo movimentos celulares. Esta proteína apresenta quatro genes em humanos: TPM1, TPM2, TPM3 e TPM4. O presente trabalho tem como objetivo específico avaliar a expressão de mRNA do gene TPM2 em carcinomas mamários ductais invasivos (CDI) em comparação com tecido mamário não tumoral. O estudo vem sendo realizado com amostras provenientes do Hospital Nossa Senhora das Graças e de Clínicas, coletadas no ato cirúrgico, após a assinatura de consentimento livre e esclarecido. Até o momento foram analisadas 36 amostras de CDI e 8 de tecido não tumoral. O RNA é extraído das amostras tumorais e não tumorais com o kit RNeasy®(Qiagen), com posterior síntese de DNA complementar por meio da transcriptase reversa usando-se o kit High CapacitycDNA Reverse Transcription (AppliedBiosystems). A análise da expressão gênica por PCR em tempo real está sendo realizado pelo método de quantificação relativa delta-delta Ct com o uso de SYBR Green e dois genes de referência. A análise estatística realizada através do teste de Mann-Whitney mostrou uma diminuição da expressão do gene TPM2 da ordem de quatro vezes em relação ao tecido mamário não tumoral (p=0,0001). Esta diminuição pode colaborar para o desarranjo dos filamentos de actina contribuindo para o estabelecimento e evolução da doença.

Palavras-chave: Câncer de Mama, Tropomiosinas, mRNA